发表者：北京博奥森生物      发表时间：2016-2-15

荧光素直接标记的一抗（直接免疫荧光法） 试剂准备： 1.准备荧光标记的一抗和同型对照抗体 2.细胞洗液：含有2%BSA（牛血清白蛋白）、0.1%叠氮钠的PBS. 3.固定液：1%多聚甲醛PBS液（pH7.2）pH值一定要准确，否则会影响检测结果。 操作方法： 1.每个样品取2支流式检测管，分别注明同型对照和待测，两管分别加入106-7/100μl个待侧细胞（若细胞浓度低或加入的细胞悬液较多，可1200转/每分钟，10分钟低温离心，弃上清，保证100μl被检样品）。 2.同型对照管中加入荧光标记同型对照抗体，做阴性对照；待测管中加入荧光标记的一抗，作为实验管，各加30μl (按抗体使用说明书，一抗可做选择几个梯度1：20、50、100倍稀释)混匀即可。 3. 4℃度孵育30分钟，加入细胞洗液，1200转/每分钟，10分钟低温离心，反复2次。 4.去除上清，控干，加入固定液0.5ml,混匀。 5.上机检测，先做同型对照，调整电压至阴性区范围，再测实验管即可。