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Bioss标记服务|用标记丰富百家学科-北京博奥森生物技术有限公司
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Bioss标记服务|用标记丰富百家学科
发表者:北京博奥森生物      发表时间:2020-5-11


服务内容

1、可接收的待标记样品包含抗体IgG、大分子蛋白、小分子多肽、小分子化合物等。

2、可提供标记服务的标记物有:

A.酶标记物:碱性磷酸酶 (AP/ALP),辣根过氧化物酶 (HRP);

B.生物素 (Biotin);

C.常规荧光素:FITC,Rhodamine B (RBITC);

D.Cy系列荧光素:Cy3,Cy5,Cy5.5,Cy7;

E.Alexa Fluor 系列荧光素:AF350,AF488,AF555,AF594,AF647;

F.荧光蛋白:藻红蛋白 (PE),别藻蓝蛋白 (APC);

G.荧光双标记:PE-Cy3,PE-Cy5,PE-Cy5.5,PE-Cy7;

H.胶体金标记Co-Au。

样品要求

1、待标记样品需保证90%以上的纯度,样品中不含有干扰标记物结合的成分,如有特殊成分,请提前标注说明。

2、待标记样品最小标记量为1mg,最好是干粉,如果是液体,浓度应大于1mg/ml。

3、抗体IgG样品中应不含BSA、叠氮钠、甘氨酸等成分。

4、大分子蛋白应提供分子量、等电点、缓冲液成分及pH等信息;小分子多肽需提供氨基酸序列;小分子化合物还需提供分子结构式。

收费标准

1、抗体和大分子蛋白标记收费标准(单位元):

注:ALEXA FLUOR 系列染料是由美国生命技术公司 (Life Technologies)旗下的分子探针公司 (Molecular Probes)开发的专利荧光染料,我公司已经购买授权,可用于商务标记。

2、小分子多肽和化合物因为分子量较小,标记和纯化需要特殊处理,价格和标记周期根据样品的特性而定。

注意事项:

1、除了HRP的质量外,所要标记的抗体也要活性高、效价高、纯度高、亲和力好、这是保证标记物活性的首要条件。

2、标记物的保存条件,建议以储存液形式保存,浓的标记物相对稳定,通常加入30~40%甘油于-20℃以下保存1~2年,但稀释后,只能保存数周。故应用液应在12小时内用完,切忌反复冻融。


标记物介绍

碱性磷酸酶 (alkaline phosphatase,ALP或AP)是免疫诊断试剂产品最常用的标记酶之一,优点是稳定性高、灵敏度高。ALP是一种能够将对应底物去磷酸化的酶,即通过水解磷酸单酯将底物分子上的磷酸基团除去,并生成磷酸根离子和自由的羟基,这类底物包括核酸、蛋白、生物碱等。而该脱去磷酸基团的过程被称为去磷酸化或脱磷酸化。碱性磷酸酶是磷酸酶的一种,磷酸酶的作用与激酶的作用正相反,激酶是磷酸化酶,可以利用能量分子,如ATP,将磷酸基团加到对应底物分子上。

辣根过氧化物酶 (Horseradish Peroxidase,HRP)活性高,稳定,分子量小,纯酶容易制备,所以最常用。HRP广泛分布于植物界,辣根中含量高,它是由无色的酶蛋白和棕色的铁卟啉结合而成的糖蛋白,糖含量18%。HRP由多个同功酶组成,分子量为40,000,等电点为PH3~9,酶催化的最适PH因供氢体不同而稍有差异,但多在PH5左右。酶溶于水和58%以下饱和度硫酸铵溶液。HRP的辅基和酶蛋白最大吸收光谱分别为403nm和275nm,一般以OD403nm /OD275nm的比值RZ (德文ReinheitZahl)表示酶的纯度。高纯度的酶RZ值应在3.0左右(最高可达3.4)。RZ值越小,非酶蛋白就越多。

FITC和RhodamineB (RBITC)是常见的荧光素,性质较稳定。

Cy系列荧光染料由于荧光较强,对光猝灭有抵抗力而荧光不宜消退,近年来应用比较广泛。

ALEXA FLUOR®系列染料是由美国生命技术公司 (Life Technologies)旗下的分子探针公司 (Molecular Probes)开发的系列荧光染料,其激发光和发射光光谱覆盖大部分可见光和部分红外线光谱区域,应用广泛。以高亮度、稳定性、仪器兼容性、多种颜色、pH值不敏感以及水溶性为主要特点。Alexa Fluor染料在一个广泛的pH范围内保持强荧光。

PE和APC是从海藻中分离纯化的,目前普遍使用的新型荧光标记试剂。在特定波长激发下,藻胆蛋白能发射强烈的荧光,其荧光强度是荧光素的30-100倍。具有很好的吸光性能和很高的量子产率,在可见光谱区有很宽的激发及发射范围。

PE和Cy荧光染料可以组合成荧光很强的共轭染料,它的特点是可以在较低的光谱下被激发(通常是488nm),同时也可以在Cy荧光染料对应的光谱下被激发,这有利于流式检测时做更多的荧光组合。

生物素(Biotin),又名维生素B7或维生素H,是噻吩与尿素相结合的骈环化合物,带有一戊酸侧链,有α,β两种异构体。生物素是羧化酶的辅基,在体内参与CO₂的固定和羧化反应。生物素可以用作核酸探针的标记物,它能与核酸分子的UTP或dUTP5‘位上的C相结合,并可与亲和素结合而被检测。在检测的过程中,生物素只用作固定连接,而不用作信号检测。

胶体金是一种常用的标记技术,是以胶体金作为示踪标志物应用于抗原抗体的一种新型的免疫标记技术,有其独特的优点。近年已在各种生物学研究中广泛使用。在临床使用的免疫印迹技术几乎都使用其标记。同时在流式、电镜、免疫、分子生物学以至生物芯片中都可能利用到。
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