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Bioss一站式抗体制备服务-北京博奥森生物技术有限公司
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Bioss一站式抗体制备服务
发表者:北京博奥森生物      发表时间:2020-5-11

Bioss专注于抗体研发生产十九年,拥有专业的抗体研发生产团队,可为客户提供包含抗原设计—多肽合成/蛋白表达—动物免疫—抗体纯化—抗体标记—免疫学检测等项目的一站式抗体制备服务。


抗体制备服务内容

Bioss可提供兔、小鼠、大鼠、羊、狗等多种动物种属的多克隆抗体制备服务(点击填写申请表)以及小鼠单克隆抗体制备服务(点击填写申请表)。

1、客户提供抗原,抗原可包含:天然蛋白、重组蛋白、细胞或细胞提取液、病毒或病原体、菌种或菌体蛋白、小分子多肽、化合物;其中小分子多肽和化合物等半抗原免疫前需偶联载体蛋白。

2、客户仅提供蛋白名称、GeneID、核酸序列、氨基酸序列等信息,我公司根据客户的实验需求设计抗原,合成多肽抗原或表达蛋白抗原,免疫动物制备抗体。


单克隆抗体/多克隆抗体制备服务项目差异

单克隆抗体/多克隆抗体

利用生物体对抗原物质产生免疫应答并产生抗体的机制,选用特定抗原物质对机体持续刺激使其产生大量特异性抗体,之后收集纯化得到针对特定抗原的特异性抗体, 这一过程就是抗体制备。 抗体制备主要步骤包括:获得理想免疫原、免疫动物、分离血清和纯化抗体,这样得到的抗体即称为多克隆抗体 ;而单克隆抗体是通过经典的杂交瘤细胞技术,在小鼠免疫后,将分泌抗体的B淋巴浆细胞与骨髓瘤细胞融合,使得B淋巴浆细胞获得永生化。再通过有限稀释法将融合细胞单克隆化,利用包被相应抗原的96孔板对细胞上清进行筛选,上清中有相应抗体,则呈现阳性结果。将阳性孔所对应的杂交瘤细胞株挑出,即为所获得的单克隆细胞株。单克隆细胞株可通过体外细胞培养或小鼠腹水的方式扩大生产单克隆抗体。


单克隆抗体/多克隆抗体制备差异

抗体的制备,无论是单抗还是多抗,其前期的动物免疫步骤是完全相同的,差异仅仅在筛选。或者说,单抗是在多抗制备的基础上,进一步筛选并稳定表达特异单克隆细胞株的结果。当抗原免疫动物后,在淋巴结和脾等淋巴器官内通过一系列抗原处理和递呈,促使B淋巴浆母细胞 (Plasmablasts, PBs)分化成熟,在转录水平成为分泌特异抗体的B淋巴浆细胞 (Plasma cells, PCs),大量不同的浆细胞会分泌不同的针对抗原的抗体。由此,可以说每一个B浆细胞都成为一株单克隆抗体的候选者。 传统的单克隆抗体制备就是通过将小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞系融合,筛选能够分泌特异抗体并稳定传代的融合细胞株而实现的。而多克隆抗体(多抗)的制备就是从血清中分离纯化所有的未经筛选的单克隆抗体。从以上过程可以看出,无论是单抗还是多抗制备方法,其针对靶点(抗原)的特异性抗体的产生主要源于被免疫动物自身的浆细胞分化成熟。 不同在于,多克隆抗体犹如许多单克隆抗体的集合,它们有的特异性高,有的特异性低,总体特异性符合正态分布曲线的形式(如下图),而其特异性的总体表现也应处于统计学正态曲线中位线 (MID)的水平。而单抗制备后续的筛选过程,可去除大部分的非特异抗体,保留几株特异性较好的单克隆抗体。

单抗与多抗特异性示意图



单克隆与多克隆抗体差异总结

单克隆抗体

多克隆抗体

制备周期

5-6个月

2-3个月

技术要求

产量

价格

对免疫原要求

较高

特异性

高(抗原亲和纯化)

识别表位

一个

多个

非特异结合

较少

较多

灵敏度

较高

标准化

易,批间差小

较难,批间差大

稳定性

较好

凝集反应

大多数没有

沉淀反应

大多数没有

中和活性

大多数没有


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