| 产品编号 | C6135 |
| 英文名称 | Mycoplasma Treatment Reagent |
| 中文名称 | 支原体清除剂 |
| 保存条件 | -20℃保存，1年 |
| 注意事项 | This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications. |
| 产品介绍 |
产品介绍： 支原体污染是细胞培养中常遇到的问题。支原体污染可以改变细胞的特性，例如部分支原体会快速消耗培养基中的精氨酸，与细胞竞争营养，从而使细胞的生长速度减慢或停止；同时支原体还可以改变细胞的酶谱、细胞膜成分，造成细胞染色体异常或细胞病理性改变等。上述情况会严重影响到使用这些细胞所做实验的结果，导致结论不可靠。 本产品是复合抗生素制剂，含有两种有效成分，分别作用于支原体的核糖体和DNA螺旋酶，抑制蛋白质的合成， 破坏细胞膜的完整性，及抑制支原体DNA的合成和复制。且所含组分可穿透哺乳动物细胞膜，可同时除去游离形式及胞内的支原体，从而确保经过处理的细胞不会被胞内释放的支原体再次感染。使用此支原体清除剂1-2周即可杀灭90%以上的支原体，且对细胞毒副作用少。同时，本产品对革兰氏阴性及阳性菌均有抑制作用。 操作说明： 在无菌条件下，拿一管去除试剂粉末(125mg)加入10ml灭菌水，振荡溶解，配成100×储存液，过滤分装后-20°C保存。使用时按1：100的比例加至完全培养基中，配制成1×的工作培养基。 细胞传代时，离心去除培养上清后，用1×的工作培养基正常培养及传代1-2周。传代时用PBS洗细胞1-2次可提高支原体清除效率。 建议： 1. 用本产品处理细胞至常规PCR检测结果为阴性后，仍可能有痕量支原体残留，应再处理1周，并继续检测。若检测结果仍为阴性，可尝试撤去试剂正常培养2周，同时维持检测频率，确保结果没有反弹。正常培养2周后，若结果均为阴性，则该细胞为完全治愈，可减少检测频率。这样为一个完整的治疗过程。若出现反弹，细胞需要重新开始一个完整的疗程。 2. 在实验室条件允许情况下，用两台培养箱分别培养受感染与“干净”的细胞，在做去除处理的细胞暂时与受感染的细胞放一个培养箱，至检测结果为阴性后，转至另一培养箱观察。同样，如果条件允许，分别在不同的超净台处理受感染和“干净”的细胞，耗材及试剂也应分开使用。若条件不允许，也尽可能做到受感染的、在做去除处理的与“干净”的细胞分层放置。不同的细胞分开处理，优先处理“干净”的细胞，后处理在做去除的和受感染的细胞。试剂分开使用，“干净” 的细胞优先使用耗材，已开封但未使用完的耗材只处理受感染的细胞，尽最大可能减少交叉感染的可能性。 常见问题： 1. 为什么做去除处理后培养基中的黑点没有减少？ 答：目前学术界对黑点是什么尚无定论，有人认为是细胞碎片，也有人认为是无机物、真菌、 细菌甚至是黑胶虫等等，而黑点的出现与支原体感染的相关性也没有文献报道。所以黑点的多少不能反映支原体的多少。 2. 为什么会出现细胞反复感染的情况？ 答：支原体可以通过气溶胶传播，和受感染的细胞共用试剂与耗材极易产生交叉污染的问题， 从而导致刚杀灭支原体的细胞恢复正常培养后被重新感染。而人体的皮肤及口腔中也存在支原体，不规范的操作（如不戴手套处理细胞、操作过程中不戴口罩并随意交谈等），都很容易将刚杀灭支原体的细胞重新感染。因此，树立严格的操作规范并坚持执行才是避免细胞反复感染的有效途径。 |
| 1、抗体溶解方法 | |
| 2、抗体修复方式 | |
| 3、常用试剂的配制 | |
| 4、免疫组化操作步骤 | |
| 5、免疫组化问题解答 | |
| 6、Western Blotting 操作步骤 | |
| 7、Western Blotting 问题解答 | |
| 8、关于肽链的设计 | |
| 9、多肽的溶解与保存 | |
| 10、酶标抗体效价测定程序 | |
